Actividad in vitro anti-Leishmania (Trypanosomatidae) del epóxido trans-Z-&-bisaboleno y del Safrol, en frutos de Piper auritum (Piperaceae) / Anti-Leishmania (Trypanosomatidae) activity of trans-Z-&-bisabolene epoxide and isolation of safrole, in fruits of Piper auritum (Piperaceae)

Resumen La leishmaniasis es una enfermedad con una alta incidencia en el ser humano, que puede ser controlada, pero como los tratamientos tienen efectos secundarios importantes se han realizado estudios de diversas plantas con el fin de encontrar compuestos con actividad antileishmaniásica que presenten pocos efectos nocivos para el ser humano. El presente estudio consistió en realizar un tamizaje fitoquímico de la planta, para identificar la presencia de cumarinas, terpenos, triterpenos y azúcares reductores. El objetivo fue encontrar componentes químicos puros con actividad contra el parásito Leishmania sp. Por tal razón se purificaron los compuestos: trans-Z-alfabisaboleno y el Safrol, a los que se les realizaron pruebas del efecto anti parasitario que presentaron un CI50 de 50.0 µg/mL y 0.0 µg/mL, respectivamente. Además, se discute la importancia de estos nuevos hallazgos. El compuesto mayoritario presente en los aceites esenciales (Safrol) no es el componente que presentó la actividad. Es importante realizar estudios sobre su proyección en el tratamiento de la leishmaniasis.

Abstract The leishmaniosis disease incidence is high in tropical regions, and its current treatment has shown severe secondary effects. Considering this problem, many studies have focused on plants, looking for chemical components that have anti-leishmanial activity, and are free of adverse effects for human beings. The purpose of this work was to find a chemical component with this kind of activity in Piper auritum. In a phytochemical screening of this plant, we found some cumarins, terpens, triterpens and reducing sugars; and later, we identified the components trans-Z-α-bisabolene epoxide and Safrol. The first component presented a CI50 of 50.0 µg/mL of anti-Leishmania activity. The Safrol, which is the major component of the essential oils of this plant, did not show antiparasitic activity. These results are discussed considering treatment of leishmaniasis. Rev. Biol. Trop. 66(2): 826-835. Epub 2018 June 01.

Actividad contra Leishmania sp. (Kinetoplastida: Trypanosomatidae) de plantas en una Reserva Biológica de Costa Rica / Anti-leishmanial activity in plants from a Biological Reserve of Costa Rica

Leishmaniosis is an important human disease very difficult to treat. For this reason, many researchers in the world have been looking for anti-leishmanial chemical components present in several plant species. In Costa Rica, since no studies have been done in this field, this work aimed at the search of active chemical components in local plants that may have an activity against Leishmania sp. A total of 67 plants were selected from the Alberto Manuel Brenes Biological Reserve (REBAMB). For these collected plants, fresh or dried hidroalcoholic extracts of root, stem, mature or young leaves, flowers, and immature or mature fruits, were prepared under conventional methods. All extracts were tested for their effectagainst a strain of Leishmania (OCR with known characteristics). Firstly, by presumptive tests, we selected only those with some activity, and then, more specific studies were done to determine the IC50 in µg/mL; a promising plant was considered only if at least one of its parts presented an IC50<100µg/mL. Under this parameter, the following active plants were obtained and their lowest and highest IC50 obtained values presented (µg/mL): Bocconia frutescens (0.6 and 66.7), Clematis dioica (27.5 and 44.4), Cordia megalantha (80.0), Eugenia austin-smithi (90.6), Guarea bullata (98.8), Guateria tonduzii (44.4 and 66.3), Mikania holwayana (45.0 and 95.6), Nectandra membranacea (44.5 and 58.6), Neurolaena lobata (25.0 and 100.0), Persea povedae (76.9), Piper auritum (60.0), Rollinia pittieri (43.1), Solanum arboreum (25.8 and 72.5), Tetrorchidium euryphyllum (53.8 and 95.0), Witheringia solanacea (15.9 and 98.1) and Zanthoxylum juniperinum (23.4 and 97.5). Although the parasitic effect of fresh or dried extracts were almost similar, the fresh material slightly showed better results. That anti-parasitic effect occurred in one or more than four parts of the plant.Most of the active extracts did not produce lysis and aglutination which indicates a low toxicity. Since the species studied are different from those analyzed by other authors, we discuss the importance of these new findings, in relation to the new scientific knowledge, and the possible use of these plants as a leishmaniosis treatment. Rev. Biol. Trop. 62 (3): 1229-1240. Epub 2014 September 01.

La leishmaniosis es una enfermedad muy importante para el ser humano pero su tratamiento es bastante difícil. Por esta razón muchos investigadores han venido buscando plantas que contengan componentes químicos activos contra esta parasitosis. En Costa Rica no se tienen estudios al respecto y por eso el objetivo de este estudio fue la búsqueda de componentes activos contra Leishmania sp. en plantas de Costa Rica; 67 especies de la Reserva Biológica Alberto Manuel Brenes (REBAMB) fueron seleccionadas para realizar este trabajo. Para ello se prepararon extractos crudos hidro-alcohólicos de material fresco o desecado de raíz, tallo, hojas maduras o tiernas, flores y frutos inmaduros o maduros. Usando pruebas presuntivas y luego específicas, se analizó el efecto de tales extractos sobre una cepa de Leishmania (OCR). Se consideraron plantas promisorias solamente aquellas en que al menos una de sus partes presentara un CI50<100µg/mL. Las plantas seleccionadas fueron: Bocconia frutescens, Clematis dioica,Cordia megalantha, Eugenia austin-smithii, Guarea bullata, Guateria tonduzii, Mikania holwayana, Nectandra membranacea,Neurolaena lobata, Persea povedae, Piper auritum, Rollinia pittieri, Solanum arboreum, Tetrorchidium euryphyllum, Witheringia solanacea y Zanthoxylum juniperinum. Existió una ligera tendencia de positividad mayor para los extractos frescos y la actividad se presentó en una y hasta más de cuatro partes de la planta. La mayoría de los extractos activos no fueron tóxicos. Se discute la importancia de estos nuevos hallazgos, en relación con el nuevo conocimiento científico y su proyección en el tratamiento de la leishmaniosis.

Estado actual de la transmisión de la toxoplasmosis por productos cárnicos en Costa Rica / Current status in Costa Rica of toxoplasmosis transmission through meat products

Antecedentes: la toxoplasmosis es una enfermedad que aunque casi siempre cursa en una modalidad de tipo crónica usualmente asintomática, eventualmente puede causar problemas en el ser humano como aborto y lesiones oculares. Por tal razón, conocer las posibles fuentes de contaminación al ser humano es importante y en este estudio se tiene como objetivos revisar la literatura en cuanto a la transmisión por productos cárnicos y determinar la positividad por Toxoplasma gondii en dos tipos de productos cárnicos para consumo humano, comparando los datos actuales con los obtenidos hace más de 10 años. Métodos: animales de laboratorio fueron alimentados con carne molida o chorizo obtenido de los diferentes surtidores de estos productos y usando técnicas inmunológicas se determinó si los animales se contaminaron con el parásito al ingerir dichos productos. Resultados: en el 4 por ciento de los animales alimentados con chorizo o con carne molida se presentaron anticuerpos contra T. gondii, porcentaje considerable más bajo que el encontrado 12 años antes bajo la misma metodología. Conclusión: después de hacer un análisis histórico del tema se concluye que aparentemente ha habido una disminución en la carne infectada con T. gondii...

Efecto inmunosupresor de la infección por Trypanosoma musculi (Mastigophora: Trypanosomatidae) en la toxoplasmosis experimental / Immunosuppressor effect of Trypanosoma musculi (Mastigophora: Trypanosomatidae) on experimental toxoplasmosis

The immunosuppression caused by species of the gender Trypanosoma has been widely documented. The influence over experimental infections with Toxoplasma gondii is evident when using Trypanosoma lewisi, a natural parasite of white rats. We decided to test the effect of Trypanosoma musculi from mice, an organism with very similar biological characteristics to T. lewisi, to see if this trypanosomatid could induce a similar effect. Four groups of Swiss mice were inoculated with T. musculi previously to infection with T. gondii, and we determined the survival of the animals, as well as the number of cysts developed in the brain of survivors. We isolated and tested different strains of T. gondii from different sources. In a first experiment, the animals were previously inoculated with T. musculi at different times prior to the infection with Toxoplasma; this allowed us to determine that the immunosuppression process resulted more evident when T. musculi inoculation was made four days before. In a second experiment, we used different inoculi dose and found that it did not influenced the process. Furthermore, the results were negative when evaluating if the amount of the inoculated trypomastigote influenced the process. In order to demonstrate if there were differences in the immnosuppressive effect, related to Toxoplasma strains, groups of mice were inoculated with brain cysts of TFC, TLP, TLW and TBT strains. Excluding the TLP strain, that resulted to be very pathogenic regardless the previous inoculation with T. lewisi, the other strains kept the same pattern of immunosuppression in mice, whose survival time was shorter as the presence of cysts in the brain was higher. These observations were in agreement with an experi- mental immunosuppression model, associated with immunosuppressive diseases, specially cancer and AIDS.

La prevalencia de infecciones por Toxoplasma gondii en el ser humano es de 5-90% según la zona geográfica; en Costa Rica por ejemplo, la seroprevalencia es de un 58%, por lo que es importante comprender algunos procesos inmunológicos, propios en estas afectaciones parasitarias. Con el objeto de determinar si el Trypanosoma musculi ejerce procesos de inmunosupresión sobre Toxoplasma gondii se realizó un experimento en el que se inocularon ratones Swiss con T. musculi cuatro, cinco, seis y siete días previos a la infección con T. gondii, ocurriendo la inmunosupresión cuando la inoculación con T. musculi fue hecha cuatro días antes. Además, la cantidad de tripomastigotos inoculados no influyó en el proceso. Se probaron tres cepas de T. gondii aisladas de las heces de un gato casero (TFC), de un Leopardus pardalis (TLP), de un Leopardus wiedii y de la carne de un Bos taurus (TBT). La cepa TLP resultó ser muy patógena, matando a los animales en un tiempo corto, independientemente de la inoculación con T. musculi; para las otras cepas se mantuvo el patrón de inmunosupresión en los ratones. Se reporta entonces un modelo experimental de inmunosupresión, aspecto muy en boga en este momento, por su relación con enfermedades que inducen esta condición en el ser humano, especialmente a enfermedades como el cáncer y el SIDA. Este modelo es más fácil de aplicar experimentalmente que el correspondiente con T. lewisi previamente descrito, el cual usa ratas blancas de más difícil manejo que los ratones usados en este estudio.

Concentración natural de compuestos antimaláricos en artrópodos tropicales (in vitro)

Natural concentration of antimalaric components in Tropical arthropods (in vitro). Alcohol, hexane and dichlorometane extracts of 751 samples of Costa Rican arthropods were studied for the presence of antimalaric components. With Plasmodium berghei we set an in vitro model in which the effect of the extract was determined by staining of the parasites with cresil brilliant blue. Active extracts at concentration of 50 mg or less, were considered positive. Promissory extracts were found in the orders Lepidoptera (24.1%), Coleoptera (32.8%), Hemiptera (38.5%) and Polydesmida (81.3%). Since most of the Lepidoptera samples were in the immature stages, the relation with the host plant was analyzed. Cannaceae, Flacourtiaceae, Crisobalanaceae, Lauraceae, Fagaceae, Ulmaceae, Rosaceae, Asteraceae, Rubiaceae, Lauraceae and Caprifoliaceae were related with the Lepidoptera larvae, and an antimalaric effect has been reported in most of these families. In the orders Polydesmida, Opiliones and Blattodea, the extract from adults also had some important effect, probably because all of them fed on plants. Polydesmida and Opiliones have chemical substances that probably serve as defensive purposes; these chemicals could also have some antiparasitic effect. Therefore, the detection of antimalaric components in arthropod species led to the identification of plants with promissory antimalaric components. Rev. Biol. Trop. 56 (2): 473-485. Epub 2008 June 30.

Extractos alcohólicos, hexánicos y diclorometánicos de 751 muestras de artrópodos fueron estudiados por la presencia de actividad antimalárica. En este trabajo se empleó un modelo murino usando el Plasmodium berghei, modelo que es biológicamente similar a la malaria humana. El estudio fue realizado determinando el efecto del extracto sobre el parásito por la inclusión o no del colorante azul de cresil brillante. Estimando como positivos aquellos extractos cuya actividad antimalárica se mostró en concentraciones no mayores de 50 mg, se encontró que los órdenes más promisorios fueron Lepidoptera (24.1%), Polydesmida (81.3%), Blattodea (25%) y Opiliones, entre otros. Las formas inmaduras de Lepidoptera fueron las más positivas, por lo que se analizaron las plantas hospederos de donde se alimentaban dichos organismos. Las familias de estas plantas eran Malvaceae, Acanthaceae, Rutaceae, Myrtaceae, Solanaceae, Fabaceae, Urticaceae, Anacardiaceae, Rosaceae, Asteraceae, Rubiaceae, Lauraceae y Caprifoliaceae. Especies de casi todas estas familias han sido reportadas con actividad antimalárica. En el caso de los órdenes Polydesmida, Opiliones y Blattodea, cuyas formas adultas presentaron alguna actividad contra P. berghei, encontramos que todos esos grupos se alimentan también de plantas. En el caso de Opiliones sus especies son predadores de lepidópteros, coleópteros, hemípteros fitófagos y otros artrópodos, además de que producen sustancias de defensas tales como alcoholes, cetonas y quinonas, entre otros, todo lo cual podría explicar la actividad encontrada. Algunas especies del Orden Polydesmida, también secretan ciertas sustancias químicas, las cuales podrían tener un efecto antiparasitario. Así, a través de este trabajo en artrópodos hemos llegado a identificar fuentes vegetales potenciales para componentes antimaláricos.

Parásitos en monos carablanca Cebus capucinus (Primates: Cebidae) de Costa Rica / Parasites of white face monkeys (Cebus capucinus) (Primates: Cebidae) of Costa Rica

Fecal samples of 53 white face monkeys (Cebus capucinus) from some sites of Costa Rica were studied for blood and intestinal parasites. Animals were anesthetized with darts containing Telazol, blood and fecal samples were collected and all the material was studied in the laboratory. For blood parasites, Giemsa stain andKnott concentration was performed. Intestinal parasites were studied by direct examination in 0,85 percent saline solution and a Iodine solution. Haematoxylin stain was used for better protozoa identification. Strongyloides sp, hookworms, acanthocephalid eggs and other nematodes, as well as Tritrichomonas sp (more frequent) and other protozoa were found. The presence of at least one parasites was observed in 33.3 percent to 100 percent of the fecal samples with an average of 73.6 percent. There was not any correlation between sex and infection rate, but the presence of parasite was higher in heavier (older) animals. Microfllarias were the only blood organism detected.The reasons for these high infection rates could be explained for feed diversity, contaminated soil and water contact and sociability of these animals, among other factors.

Se capturaron y anestesiaron un total de 53 primates de la especie Cebus capucinus por medio de dardos con tiletamina de diferentes zonas de Costa Rica. Todos los animales fueron estudiados por la presencia de parásitos sanguíneos e intestinales. En la sangre sólo se encontraron microfilarias (24,5 por ciento) las cuales fueron diagnosticadas usando la concentración de Knott y la tinción de Giemsa. Los parásitos intestinales fueron observados en forma directa y algunos de los protozoos también fueron tejidos con hematoxilina de Heidenhain. Los parásitos encontrados fueron Strongyloides sp, uncinarias, acantocéfalos y otros nemátodos no identificados, en porcentajes que variaron según las zonas de captura. Los índices de infección determinados por la presencia de al menos un parásito fluctuaron entre 33,3 por ciento y el 100 por ciento con una media general del 73,6 por ciento, no existiendo diferencias de infección en cuanto al sexo de los animales. En general se notó un mayor grado de infección en los animales de más peso (más edad) tal y como se ha observado en otros países. Se considera que las infecciones parasitarias son más elevadas en esta especie, posiblemente por tener una alimentación más variada, un mayor contacto con el suelo y aguas contaminadas, así como la gran sociabilidad de estos monos. La presencia de estos parásitos podría ser una de las causas, entre otras para acelerar el riesgo de extinción de los primates en Costa Rica y en América.

Miocarditis y miocardiopatía dilatada por Trypanosoma cruzi: reporte de un caso / Myocarditis and dilated myocardiopathy by Trypanosoma cruzi: case report

The agent of Chagas disease, Trypanosoma cruzi, is one of the major causes of myocarditis and dilated myocardiopathy in America. In Costa Rica, the latest studies revealed that the improvement of the general live conditions, has decreased the Chagas disease incidence in this country and its deadly complications. We described the clinical history and the autopsy findings of an infrequent case of death by this disease in Costa Rica, represented by myocarditis and dilated myocardiopathy manifestations caused by T. cruzi, where the diagnosis was made post-mortem.

El Trypanosoma cruzi, agente causal de la Enfermedad de Chagas, constituye una de las principales causas de miocarditis y miocardiopatía dilatada en el continente americano. En Costa Rica, las últimas encuestas indican que las mejores condiciones de vida actuales han disminuido la incidencia de esta enfermedad y por consiguiente sus complicaciones; sin embargo, en el presente artículo se describió el cuadro clínico y los hallazgos de autopsia, de uno de los pocos casos de muerte por esta parasitosis en Costa Rica; se trata de un caso de miocarditis y miocardiopatía dilatada causada por T. cruzi, cuyo diagnóstico fue hecho post mortem.

Prevalencia de microsporidios en orinas de pacientes referidos para urocultivo en la Región Pacífico Central / Prevalence of microsporiodios in you tinkle of patients refered for urocultire in Región Pacífico Central

Justificación: La mayoría de las infecciones por microsporidios en el ser humano se han reportado en el tracto gastrointestinal, sin embargo, es posible hallarlos parasitando otros sitios anatómicos como el tracto genituourinario, en donde las patologías pueden variar desde uretritis hasta falla renal. Tradicionalmente esas infecciones se deben a género Encephalitozoon, parásito contra el cual el Albendazol ha demostrado ser un medicamento efectivo. Objetivo: Determinar la prevalencia de microsporidios en personas que son referidas al laboratorio para urocultivo, dados los antecedentes clínicos que presentan. Métodoss: El procesamiento de las muestras incluyó su toma con técnica aséptica, su cultivo en los medios de Agar Sangre, MacConkey y Manitol - sal para su estudio por presencia de bacterias y/u hongos y la realización de antibiograma, según los parámetros establecidos por la CCSS par los urocultivos. Adicional a esto se centrifugó una alícuota de 9 ml separado 50 microlitis de sedimentos urinario, al cual se le añadió igual volumen de KOH al 5 por ciento. Se hicieron frotis los cuales se fijaron con alcohol metílico una vez secos, y se tiñeron con la técnica tricrómica de Weber, obviando el paso de la decoloración y la deshidratación. Resultados: Se encontró un 25 por ciento de orinas positivas por microsporidios. Los pacientes con edades entre 26 y 55 años presentaron mayor positividad. Conclusiones: El porcentaje de prevalencia encontrado (25 por ciento) y el hecho de que estas infecciones pueden llegar a causar severos daños al ser humano, hacen imperativa la necesidad de realizar diagnóstico más certeros de esta parasitosis, para lo cual proponermos la tinción de Weber con la modificación presentada en este trabajo para el diagnóstico de las infecciones por microsporidios en el tracto urinario. Descriptores: Microsporidios, urolcultivo, diagnóstico, epidemiología.